«لری دیلی» (استیلر) کاری را به عنوان نگهبان شب موزه‌ی تاریخ طبیعی قبول می‌کند اما در نخستین شب نگهبانی‌اش در می‌یابد که چه کار مشکلی دارد: شب که فرا می‌رسد یک طلسم مصری، اشیا و فیگورهای مومی را زنده می‌کند!....
ماجرای فیلم ادامه قسمت اول (Night at the Museum 2006) است که حول و هوش اتفاقاتی است که در موزه اسمیت سونیان واشنگتن رخ می‌دهد. (بن استیلر) که بعد از اتفاقات داستان اول از شهر خارج شده بعد از گذشت چند وقت به شهر بر می‌گردد و متوجه می‌شود که موزه قبلی تعطیل شده و تمام اشیاء عتیقه این موزه به موزه جدیدی در واشنگتن انتقال پیدا کرده. شخصیت‌های جدید این قسمت ماجراهای جالب و خنده داری رو رقم می‌زنند که هر بیننده‌ای رو به خودش جلب می‌کند …
:داستان درباره ادوارد کارنبی ، کارآگاه ماورا الطبیعه ، غیرقابل توضیح و ماوراالطبیعه ، با کشف سرنخی که به “جزیره سایه” منجر می شود ، یک راز (مرگ اخیر یکی از دوستان) را تحقیق می کند که او را با وحشتهای عجیب روبرو می کند