American Pie on hulvaton tutkimusmatka kaikkein odotetuimpaan ja samalla kaikkein nöyryyttävimpään aikuisuuden riittiin - neitsyyden menettämiseen. Tässä hilpeässä tarinassa elämästä, rakkaudesta ja libidosta joukko poikia päättää ryhtyä tuumasta toimeen ja päästä neitsyydestään ennen koulun päättymistä. Kokemattomuudestaan huolimatta poikien hormonit hyrräävät ylikierroksilla ja konstit on monet vastakkaisen sukupuolen selätysyrityksissä.
40-vuotias Andy Stitzer on tehnyt elämässään yhtä ja toista. Hänellä on mukava työ kodinkoneliikkeessä, kodikas asunto sekä upea kokoelma toimintafiguureja ja sarjakuvia. On vain yksi elämänalue, jolla hän ei vielä ole oikein kunnostautunut? Andy ei ole koskaan harrastanut seksiä... ei edes vahingossa. No, onko se nyt niin iso juttu? Andyn työtovereiden mielestä ainakin on. Vaikka he pitävätkin Andya hieman omituisena, he ottavat tämän ongelman ratkaisemisen vastuulleen. Mikään ei tunnu kuitenkaan auttavan kunnes Andy tapaa Trishin, 40-vuotiaan kolmen lapsen äidin. Ystävät innostuvat Andyn uudesta mahdollisuudesta, kunnes kuulevat rakastavaisten erikoisjärjestelystä!
Josh retkahtaa ihanaan Bethiin ja pettää tyttöystäväänsä. Tämä syrjähyppy kuvataan videokameralla ja nauha postitetaan Joshin tyttöystävälle. Joshilla on kolme päivää aikaa ehtiä Teksasiin tyttöystävänsä luo ennen videonauhaa!
Nettifirmassa työskentelevä Matt Sullivan on murtunut eron jälkeen. Ex-tyttöystävä on löytänyt uuden rakkauden ja Matt riutuu sydänsuruissaan. Irtosuhteisiin kyllästynyt Matt päättää aloittaa uuden elämän ja kieltäytyä 40 päiväksi ja 40 yöksi seksistä. Mattin ystävät saavat tietää suunnitelmasta ja aloittavat vedonlyönnin miehen kestävyydestä. Matt tapaa kaiken lisäksi unelmiensa naisen ja rakastuu.